在進行常規(guī)的微生物限度檢查方法之前，必須驗證在實際檢查條件下，所檢測的樣品及檢驗程序不得對可能存在的各種微生物產生抑制作用。中科檢測開展微生物限度方法學驗證服務，同時具備無菌檢查和微生物限度檢查資質能力。
微生物限度方法學驗證目的
是為了確認所采用方法適合藥品細菌、霉菌、酵母菌數(shù)測定。照驗證過的檢查法和檢驗條件進行供試品細菌、霉菌、酵母菌數(shù)檢查能保證檢驗結果的準確、可靠。驗證過程中將會遇到以下難點問題：
1、藥品中污染的微生物處于不穩(wěn)定狀態(tài)，微生物種類具有不確定性；
2、在藥品生產各個環(huán)節(jié)中,微生物污染存在著不均勻性；
3、無論是無抑菌性藥物還是抑菌性藥物都要進行微生物限度檢查，特別是污染于抑菌藥物中的微生物在一定條件下可以穩(wěn)定存在一段時間，雖然它們可能受到損傷，但未死亡，如服用至人體內,當條件適宜時仍可生長繁殖。
微生物限度方法學驗證方法
依據(jù)微生物計數(shù)法（中國藥典2022年版四部1105）；
控制菌檢查法（中國藥典2022年版四部1106）；
非無菌藥品微生物限度標準（中國藥典2022年版四部1107）；
抑菌效力檢查法（中國藥典2022年版四部1121）檢查。
無菌和微生物限度的區(qū)別
一、檢驗要求環(huán)境不同
?。?）微生物限度檢查：微生物限度檢查應在環(huán)境潔凈度10000級以下的局部潔凈度100級的單向氣流區(qū)進行。整個檢驗過程必須嚴格遵守無菌操作，防止再污染。
?。?）無菌檢查是在潔凈的A級單向流通空氣區(qū)或隔離系統(tǒng)中進行的。整個過程應嚴格遵守無菌操作，防止微生物污染。必須驗證單向氣流區(qū)域和工作臺的清潔度。生物制品的無菌檢驗按照《中國生物制品規(guī)程》中有關無菌檢驗的規(guī)定執(zhí)行。
二、檢驗方法不同
?。?）微生物限度檢查是檢查非處方殺菌劑及其原料、輔料的微生物污染程度的一種方法。
?。?）無菌檢查是指對藥典規(guī)定的藥品、敷料、縫線、無菌器具等品種進行無菌檢查的方法。
三、判斷結果方法不同
?。?）微生物限度檢查：被檢培養(yǎng)基平均菌落數(shù)與對照培養(yǎng)基平均菌落數(shù)之比大于70%，菌落大小應與對照培養(yǎng)基相同。確定該介質的適用性符合規(guī)定。
（2）用需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基4管及真菌培養(yǎng)基2管，分別接種金黃色葡萄球菌、產孢梭菌和白色念珠菌。將一管添加到規(guī)定數(shù)量的試驗產品中，并將所有培養(yǎng)基管放置在規(guī)定溫度下3-5天。如果微生物在每種培養(yǎng)基24小時內生長良好，則試樣沒有抑菌作用。
