病毒清除驗(yàn)證是藥物開發(fā)中最為關(guān)鍵的步驟之一，為新藥臨床研究審批（IND）和生物制品上市申請(qǐng)（BLA）提供關(guān)鍵性的支持。這種驗(yàn)證的目的是確保病毒清除工藝的有效性，即該工藝能夠有效地消除病毒。病毒清除驗(yàn)證有助于確定病毒清除工藝的有效性，以及病毒清除工藝是否能夠有效地阻止病毒的傳播。此外，驗(yàn)證還可以確定病毒清除工藝的有效時(shí)間，以及清除病毒所需的時(shí)間，還有效比例和所需比例。

動(dòng)物源性醫(yī)療器械，根據(jù)《動(dòng)物源性醫(yī)療器械注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則》(2017年修訂版)，申請(qǐng)動(dòng)物源性醫(yī)療器械的注冊(cè)申報(bào)，所提交的研究資料中需包含對(duì)生產(chǎn)過程中滅活和去除病毒和/或傳染性因子工藝過程的描述及有效性驗(yàn)證數(shù)據(jù)或相關(guān)資料。

1）選擇指示病毒：選擇1-2種具代表性的DNA/RNA病毒，如腺病毒、腸道病毒等。
2）制備病毒懸浮液：調(diào)整病毒懸浮液濃度為107-108 TCID50/ml。
3）接種指示病毒：取醫(yī)療器械樣本，接種100μl病毒懸浮液，室溫條件下吸附30 min。
4）工藝處理：進(jìn)行病毒滅活/去除工藝處理，包括實(shí)驗(yàn)組和病毒接種的空白對(duì)照組。
5）病毒含量測(cè)試：使用細(xì)胞培養(yǎng)法、PCR法檢測(cè)處理前后樣本中病毒含量。
6）加速老化：37 ℃條件下加速老化處理樣本，樣本期末進(jìn)行病毒含量復(fù)測(cè)。
7）重復(fù)驗(yàn)證：調(diào)整工藝參數(shù)，重復(fù)驗(yàn)證測(cè)試，最終確定優(yōu)化方案。
8）統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：使用t檢驗(yàn)等方法分析比較不同組別之間結(jié)果。

1）選擇指示病毒,調(diào)制不同病毒載量的原液(例如107、106、105 TCID50/ml)。
2）設(shè)置多個(gè)時(shí)間梯度點(diǎn)(例如5min、10min、15min...)，在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)取樣。
3）在上述不同病毒載量和不同時(shí)間梯度取樣點(diǎn)，依次進(jìn)行病毒滅活處理。
4）利用細(xì)胞培養(yǎng)法定量檢測(cè)每個(gè)樣本病毒的殘余含量。
5）將各時(shí)間點(diǎn)的病毒殘余量繪制曲線，反映不同處理時(shí)間下的病毒減少趨勢(shì)。如果曲線呈指數(shù)下降，則表明該滅活方法符合一階滅活動(dòng)力學(xué)規(guī)律。
6）通過曲線計(jì)算D值，即減少90%病毒需的處理時(shí)間。D值可用于評(píng)估滅活效率。
7）最后，確定Z值，即滿足安全清除病毒的最大處理時(shí)間或次數(shù)。

YY/T 0771.3-2009/ISO 22442-3:2007 動(dòng)物源醫(yī)療器械 第3部分：病毒和傳播性海綿狀腦?。═SE）因子去除與滅活的確認(rèn)
YY 0970-2023 醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌 一次性使用動(dòng)物源性醫(yī)療器械的液體化學(xué)滅菌劑  醫(yī)療器械滅菌過程的特征、開發(fā)、確認(rèn)和常規(guī)控制的要求
《血液制品去除/滅活病毒技術(shù)方法及驗(yàn)證指導(dǎo)原則》（國藥監(jiān)注〔2002〕160號(hào)）
《動(dòng)物源性醫(yī)療器械注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則》(2017年修訂版)